细菌蛋白提取试剂 Ⅱ（变性）      P1271

描述：细菌蛋白提取试剂Ⅱ(变性)采用离子型去污剂，用于提取细菌中总蛋白，适用于后续的Western Blot等免疫实验。

适用范围：从新鲜或者冻存的细菌中提取蛋白。

规格：25ml   100ml 

储存：室温保存   12个月有效

提取方法：

1.       将细菌培养物在预先称重的离心管中4 oC，5000g 离心15分钟，收集菌体；

2.       去上清，称量菌体重量，按照每克菌体加入10-50ml细菌蛋白抽提试剂Ⅱ（变性），涡旋震荡使菌体完全重悬；

3.       室温孵育15-20分钟（孵育时间可根据细胞类型的不同做调整）。

4.       15000g，离心10分钟；

5.       将上清转移至新的离心管中，即得到总蛋白，可应用BCA法进行蛋白定量及后续实验。

注意：

1.       该提取试剂中不含有蛋白酶抑制剂，用户可根据具体情况添加蛋白酶抑制剂、还原剂、螯合剂等。

2.       当提取物粘度较高或提取的蛋白以包涵体形式存在时，建议在加入溶菌酶和DNaseⅠ.

3.       如果在提取纯化过表达蛋白的过程中，得到的部分蛋白可能在沉淀中，那么目的蛋白可能以包涵体的形式存在，可使用包涵体蛋白溶解液进行溶液，也可以优化蛋白表达条件，增加可溶性蛋白的表达。