ECL Plus超敏发光液
品牌：Solarbio | 货号：PE0010
- 别名 : ECL超敏发光液 ECL发光液
- 英文名称 : ECL Western Blotting Substrate
- 储存条件 : 4℃密封避光保存
- 单位 : 瓶
ECL Plus 超敏发光液直接或间接检测与辣根过氧化物酶HRP 关联的蛋白或核酸底物。这一独特的发光底物系统是目前最灵敏的商业化荧光ECL检测试剂，具有极高灵敏度和高信噪比，可检测出10-100 fg的微量抗原；发光迅速，荧光可使X 感光胶片感光达12小时以上，特别适用于痕量蛋白或核酸检测。同时该试剂允许使用更高的抗体稀释倍数（1：2000-1：10000），极其节省抗体。
索莱宝生产的ECL Plus级发光液，是一种可广泛应用于免疫学实验的化学发光试剂。实验效果优于市面上某知名品牌的超敏级发光液。
ECL Plus超敏发光液与辣根过氧化物酶进行反应，产生荧光，可以通过胶片和相对应的仪器进行信号收集。
ECL Plus灵敏度极高，是市面上普通DAB的1000倍以上，在western实验中，HRP标记的抗体（1mg/ml）能达到10万级稀释，是某品牌的2-5倍左右。极高的灵敏度可以让及大幅度的节省抗体成为可能，在这种情况下需要降低一抗或者二抗的稀释度，避免得到的是过暗的条带，难以比较。
ECL Plus超敏发光液发光时间长，将兔的IgG制备成蛋白上样样品，进行正常的免疫印迹实验（上面提到的都是这种情况情况下的稀释度，斑点试验的稀释度会更高），在化学发光拍照仪器上进行信号收集，在20分钟后，荧光强度与初始的荧光强度基本无变化，30分钟后二抗浓度高的荧光稍有衰减，其他的基本没有变化。
《HpSlyD inducing CDX2 and VIL1 expression mediated through TCTP protein may contribute to intestinal metaplasia in the stomach》 作者：Qiuping Li, Yanmei Zhu, Jun Liu, Xiuwen Yu, Moye C 期刊：《Scientific Reports 7, Article number: 2278 (2017)》 影响因子：4.259 PMID：28536478
《Microgravity induces inhibition of osteoblastic differentiation and mineralization through abrogating primary cilia》 作者：Wengui Shi, Yanfang Xie, Jinpeng He, Jian Zhou, Yu 期刊：《Scientific Reports 7, Article number: 1866 (2017)》 影响因子：4.259 PMID：28500304
《Enhanced osteogenesis and angiogenesis by mesoporous hydroxyapatite microspheres-derived simvastatin sustained release system for superior bone regeneration》 作者：Wei-Lin Yu, Tuan-Wei Sun, Chao Qi, Hua-Kun Zhao, Z 期刊：《Scientific Reports 7, Article number: 44129 (2017)》 影响因子：4.259 PMID：28287178
《Rosiglitazone attenuates myocardial remodeling in spontaneously hypertensive rats》 作者：Hypertension Research (2011) 34, 354-360 期刊：《Hypertension Research (2011) 34, 354-360》 影响因子：3.581 PMID：21248758
| 商品货号： | 商品品牌： | 规格 | 基本售价： | 选择规格 |
|---|---|---|---|---|
| PE0010-12.5ml*2 | Solarbio | 12.5ml*2 | 240.00元 | |
| PE0010-50ml*2 | Solarbio | 50ml*2 | 800.00元 | |
| PE0010-250ml*2 | Solarbio | 250ml*2 | 3200.00元 |
使用方法：
1、常规电泳、转膜、HRP 标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。注意用 HRP 标记 IgG 或用一抗-链亲和素
-生物素-HRP 夹心法。核酸杂交膜用 HRP 标记探针杂交，洗膜。
2、在洗涤膜上的 HRP 标记二抗的同时，新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液 A 和 B 混合，放
置使之恢复室温否则会减弱荧光强度。建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有减
低。
3、 用镊子取出膜， 搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。 将膜完全浸入并与发光工作液充分接触 （约
0.125ml 发光工作液/cm 2 膜）。室温孵育 3 分钟后立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度，有时还会
导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应，使用过少的发光工作液不利于反应进行，也会导致膜上
条带曝光不均匀和灵敏度明显降低。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。
4、用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。
5、在 X 光胶片暗盒内面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将杂交膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包
裹杂交膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖
杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内，最好蛋白带面向上。
6、在黑暗中放入 X 感光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。
注意事项：
1、步骤 1-5 可在日光灯下操作；但发光液暴露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低，移到暗房操作
可避免。戴手套可以避免在膜上留下手印，保持膜的洁净。
2、长时间曝光或蛋白质过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。
3、发光工作液孵育约 3 分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋白条带发光
较弱，肉眼虽不可见但能使 X 胶片曝光。不能单凭肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上
可持续数小时并使 X 胶片感光，因而弱带可曝光 1-10 小时。如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，
重新孵育二抗，然后重新用 ECL 发光和曝光。
4、由于超敏发光液的高灵敏度，强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1：1000-1：4000，二抗 1：
2000-1：5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带，导致失败！
5、某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜，例如“克林莱”牌保鲜膜。
6、使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可帮助确定胶片上条带的准确位置
和大小。
7、NaN3 能抑制 HRP 活性，回收二抗时应避免使用 NaN3，如必需使用勿超过 0.01%。
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