突变是指在PCR过程中通过碱基改变而引起蛋白质氨基酸的改变。 定点突变:在DN**段的特定位点引入碱基改变,或者片段的插入以及删除。 | ||||||||||||||||||||||||||||
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1、可突变任何来源于 dam+阳性菌株的质粒 2、非PCR线性反应,可减少不需要的错误 3、点突变,缺失突变,插入突变 4、突变扩增4-14 kb大小, 具有 > 85% 突变效率 5、突变< 1 hr ,加上 overnight 转化 | ||||||||||||||||||||||||||||
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1、Agilent独有 2、非PCR 线性反应减少不需要的错误 3、可突变任何来源于 dam+阳性的菌株 4、约 2 hr 加上 overnight 转化 5、优化后可突变< 8 kb的质粒 6、每个反应可进行1-5 点突变 7、每个突变点仅需一条突变引物 8、突变效率扩增出一条封闭的单链 Agilent部分定点和多点突变试剂盒列表:
随机突变是指目的基因发生突变的部位是随机的, 如PCR克隆基因时, 往往产生不确定序列的突变。在Tag酶的作用下, 有时在遇到模板中的A-T对时, 倾向于掺入G-C对, 而使基因序列发生改变。随机突变常用于鉴定克隆的DNA中特定功能在基因序列中所处的位置及其与周围序列的关系。如果对所克隆的DNA特定序列所编码的产物及其功能知之甚少,可采用随机突变法进行研究,以确定功能区域有助于缩小研究范围。 | ||||||||||||||||||||||||||||
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2、GeneMorph II EZ Clone适用于文库构建,突变均一,突变频率1-16/kb,可扩增3.5kb的片段
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